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特殊染色

來(lái)源:萬(wàn)物生物   發(fā)布時(shí)間:2021-11-02

特殊染色

為了顯示與確定組織或細(xì)胞中的正常結(jié)構(gòu)或病理過(guò)程中出現(xiàn)的異常物質(zhì)、病變及病原體等,需要分別選用相應(yīng)的顯示這些成分的染色方法進(jìn)行染色。包括:膠原纖維染色(Masson等)、網(wǎng)狀纖維染色、彈力纖維染色、肌肉組織染色(磷鎢酸蘇木素)、脂肪染色(蘇丹III)、糖原染色(PAS)、粘液染色(PAS)等。

Masson染色

Masson染色是指用兩種或三種陰離子染料混合,膠原纖維呈藍(lán)色,肌纖維呈紅色。用來(lái)顯示組織中纖維以及炎性因子的染色方法之一,色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān)。膠原纖維、粘液、軟骨呈藍(lán)色(如光綠液染色為綠色),胞漿、肌纖維素、神經(jīng)膠質(zhì)呈紅色,胞核黑藍(lán)色。主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。

PAS染色(糖原染色)

主要用來(lái)檢測(cè)組織中的糖類。全稱為過(guò)碘酸雪夫氏染色(schiff periodic acid shiffPAS),又稱糖原染色,其原理為過(guò)碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無(wú)色品紅結(jié)合,變?yōu)榧t色,定位于胞漿上,在組織學(xué)上, PAS染色應(yīng)用范圍廣泛:鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡狀性質(zhì)、心肌病變及其他心血管疾病的診斷、糖原累積病診斷和研究、糖尿病診斷和研究,除用于糖原的鑒定和黏液的顯示外,還可以觀察腎小球基底膜、結(jié)腸杯狀細(xì)胞中性黏液物質(zhì)、阿米巴滋養(yǎng)體和霉菌的著色。

番紅-固綠染色

番紅-固綠染色(植物染色)適用于高等植物根、莖、葉的染色。番紅是堿性染料能顯示維管束植物木質(zhì)化、木栓化和角質(zhì)化的組織。固綠是酸性染料,是一種染含有漿質(zhì)的纖維素細(xì)胞組織的染色劑。導(dǎo)管可以被番紅染色,篩管可以被固綠染色。

番紅-固綠染色(軟骨)的染色原理在于嗜堿性的軟骨與堿性染料番紅結(jié)合呈現(xiàn)紅色,嗜酸性的骨和酸性染料固綠結(jié)合而成綠色或藍(lán)色,與呈現(xiàn)紅色的軟骨對(duì)比鮮明,從而將軟骨組織和骨組織區(qū)分開。

油紅OOil Red O)染色

油紅O是一種脂溶性偶氮染料,是很強(qiáng)的脂溶劑和染脂劑,能特異性地使組織和細(xì)胞內(nèi)中性甘油三脂、脂質(zhì)以及脂蛋白等染色。當(dāng)組織切片置入染液時(shí),染料則離開染液而溶于組織內(nèi)的脂質(zhì)(如脂滴)中,使組織內(nèi)的脂滴呈紅色。用于分析細(xì)胞樣品中脂質(zhì)狀況。注意:油紅O染色只能適用于冰凍切片或新鮮組織。

蘇丹Ⅲ染色

脂肪和蘇丹染液有比較強(qiáng)的親和力,主要用于顯示組織器官的脂肪變性和類脂質(zhì)的異常沉著。需用冰凍切片,染色后脂肪呈猩紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色。

姬姆薩染色

姬姆薩染是由天青與伊紅組成。各種細(xì)胞成分化學(xué)性質(zhì)不同,對(duì)各種染料的親和力也不一樣。嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì),與酸性染料伊紅結(jié)合,被染成粉紅色;嗜堿性顆粒如細(xì)胞核蛋白或淋巴細(xì)胞胞漿為酸性物質(zhì),與堿性染料美藍(lán)或天青結(jié)合,被染成紫藍(lán)色;中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍(lán)均可結(jié)合,呈淡紫色。

甲苯胺藍(lán)(Toluidine Blue O)

甲苯胺藍(lán)不僅含有兩個(gè)發(fā)色團(tuán),還含有兩個(gè)助色團(tuán),為堿性染料,甲苯胺藍(lán)中的陽(yáng)離子有染色作用,組織細(xì)胞的酸性物質(zhì)與其中的陽(yáng)離子相結(jié)合而被染色。可染細(xì)胞核使之呈藍(lán)色;肥大細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含有肝素和組織胺等異色性物質(zhì)遇到甲苯胺藍(lán)可呈異染性紫紅色,可用于尖銳濕疣的初篩及肥大細(xì)胞的檢測(cè),例如色素性蕁麻疹

天狼星紅染色

由于膠原呈堿性,與酸性染料起強(qiáng)烈反應(yīng)。天狼星紅就是一種很強(qiáng)的酸性染料,它可以和膠原纖維反應(yīng)使膠原纖維產(chǎn)生明顯的雙折光現(xiàn)象。天狼星紅染色膠原纖維呈紅色,胞核呈綠色,余呈黃色。偏光顯微鏡可以分辨不同的纖維類型。

基底膜六胺銀染色

基底膜六胺銀染色是一種經(jīng)典顯示基底膜的方法。組織經(jīng)過(guò)碘酸氧化,使基底膜內(nèi)的黏多糖暴露出醛基,醛基把六胺銀還原為黑色的金屬銀。氯化金可使金屬銀轉(zhuǎn)變?yōu)楦€(wěn)定的金屬金,同時(shí)使背景更清晰。六胺銀染色能清晰地顯示基底膜,在腎病變中應(yīng)用最多,常用來(lái)觀察腎小球毛細(xì)血管基底膜在炎性損傷時(shí)如斷裂、增生、折疊等形態(tài)改變。

尼氏染色

神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)都含有尼氏體,但其形狀、數(shù)量、分布位置常常不同。尼氏體也存在于樹突中,但不在于軸突和胞體的軸丘。尼氏體會(huì)因?yàn)樯頎顟B(tài)的變化而變化,尼氏體是神經(jīng)元內(nèi)合成蛋白質(zhì)合成的重要部位,當(dāng)神經(jīng)元受到刺激后,胞體內(nèi)的尼氏體會(huì)明顯減少。通常尼氏體能被堿性染料如硫堇、亞甲藍(lán)、甲苯胺藍(lán)和焦油紫等染料染成紫藍(lán)色。

普魯士藍(lán)反應(yīng)(Prussian blue reaction

普魯士藍(lán)反應(yīng)又稱為含鐵血黃素染色,即經(jīng)過(guò)亞鐵氰化鉀和稀酸處理后可以產(chǎn)生藍(lán)色,常見于吞噬細(xì)胞內(nèi)會(huì)間質(zhì)內(nèi),主要顯示三價(jià)鐵鹽。Perls普魯士藍(lán)是非常經(jīng)典的組織化學(xué)反應(yīng),是顯示組織內(nèi)三價(jià)鐵的一種敏感、傳統(tǒng)優(yōu)良的方法,其染色原理為:亞鐵氰化鉀溶液使三價(jià)鐵離子從蛋白質(zhì)中被稀鹽酸分離出來(lái),三價(jià)鐵與亞鐵氰化鉀反應(yīng),生成一種不溶解的藍(lán)色化合物即三價(jià)鐵的亞鐵氰化物普魯士藍(lán),所以該反應(yīng)被稱為普魯士藍(lán)反應(yīng)。三價(jià)鐵的亞鐵氰化物是一種很穩(wěn)定的化合物,在反應(yīng)后可用紅色染色劑進(jìn)行復(fù)染,如核固紅、伊紅、中性紅等。

Perls stain常用于顯示局部組織內(nèi)各種出血性病變,常見于吞噬細(xì)胞內(nèi)。在判斷含鐵血黃素沉積時(shí),用Perls反應(yīng)可以得到證實(shí),該染色方法可以很好的區(qū)分含鐵血黃素和其他色素。該染色液穩(wěn)定性好、可以長(zhǎng)期保存、不易產(chǎn)生沉淀、應(yīng)用范圍廣、可以進(jìn)行復(fù)染。該染色液的復(fù)染液采用核固紅,是最經(jīng)典、最常用的復(fù)染液。

β-半乳糖苷酶染色(β-Galactosidase Staining )

β-半乳糖苷酶染色是一種基于衰老時(shí)SA-β-Gal (senescence-associated β-galactosidase)活性水平上調(diào)而對(duì)衰老細(xì)胞或組織進(jìn)行染色檢測(cè)的試劑盒。在普通的光學(xué)顯微鏡下就可以觀測(cè)到細(xì)胞或組織的衰老情況。本試劑盒可以用于培養(yǎng)細(xì)胞的衰老檢測(cè),也可以用于組織切片的衰老檢測(cè)。β-半乳糖苷酶染色試劑盒以X-Gal為底物,在衰老特異性的β-半乳糖苷酶催化下會(huì)生成深藍(lán)色產(chǎn)物,光學(xué)顯微鏡下很容易觀察到變成藍(lán)色的表達(dá)β-半乳糖苷酶的細(xì)胞或組織。本試劑盒僅染色衰老細(xì)胞,對(duì)衰老前的細(xì)胞(presenescent cells)、靜止期細(xì)胞(quiescent cells)、永生細(xì)胞(immortal cells)或腫瘤細(xì)胞等不會(huì)染色。對(duì)于組織切片或組織塊,可以檢測(cè)的樣品數(shù)量視樣品的大小而定,對(duì)于普通的切片也至少足夠檢測(cè)100個(gè)樣品,使用6孔板測(cè)定,足夠測(cè)定100個(gè)樣品。

Von Kossa染色

鈣在人體內(nèi)大量存在,構(gòu)成骨骼作為支持人體的支架,在分泌、運(yùn)送、肌肉收縮、神經(jīng)傳導(dǎo)等也起重要作用。許多染料可以于鈣形成螯合物,包括茜素紅S、紅紫素、核固紅等。茜素紅S屬一種蒽醌類衍生物,是茜素磺酸鈉鹽,它能與碳酸鈣或磷酸鈣中的鈣鹽螯合形成橙紅色復(fù)合物。鈣鹽染色常用方法有硝酸銀法和茜素紅S法,本產(chǎn)品原理在于該法是一種金屬置換法,硝酸銀溶液作用于含有不溶性鈣鹽的切片時(shí),鈣被銀所置換,銀鹽在光的作用下被還原為黑色金屬銀,適用于大量樣本的鈣鹽組織染色


    部分結(jié)果展示


                         油紅O染色                                                                                        ALP染色


                                茜紅素染色                                                                                      LFB染色


                              天狼星紅染色                                                                                      masson染色


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