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產(chǎn)品詳情
操作說明
注意事項
產(chǎn)品簡介
本產(chǎn)品紅細胞裂解液（Red Blood Cell Lysis Buffer，或稱ACK Lysis Buffer），是一種經(jīng)典的用于去除紅細胞的裂解液，在不損傷有核細胞的前提下充分去除紅細胞。經(jīng)紅細胞裂解液裂解得到的組織細胞中不含紅細胞，可進一步用于原代培養(yǎng)、細胞融合、流式細胞分析、核酸與蛋白的分離及提取等。其基本原理是利用細胞內(nèi)滲透壓濃度差而導致細胞膜脹破的原理裂解紅細胞。主要成分包含氯化銨、碳酸氫鉀、EDTA-Na2。因銨根離子無法通過細胞膜，而其他離子可以通過，造成細胞內(nèi)外的離子濃度差異，外部水分擴散至細胞內(nèi)，使紅細胞膨脹，達到裂解效果。本產(chǎn)品經(jīng)0.2 μm濾膜過濾除菌。
儲存與運輸
冰袋（wet ice）運輸；4℃保存，有效期12個月。
使用方法
組織細胞樣品：
1. 新鮮組織經(jīng)胰酶或膠原酶等消化分散成單個細胞懸液，離心棄去上清液；
2. 按1:3-5比例向細胞沉淀中加入紅細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解1-2 min；
3. 800-1000 rpm離心5-8 min，離心棄去上層紅色清液；
4. 收集沉淀部分，加入Hank’s液或無血清培養(yǎng)液離心洗2-3次；
5. 如裂解不完全可重復步驟2和3；
6. 根據(jù)實驗需要用適當溶液重懸細胞，用于后續(xù)實驗；如提取RNA，最好是于步驟4開始使用DEPC水配制的溶液。
血細胞：
1. 新鮮抗凝血，離心棄去上清液；
2. 按1:6-10比例向細胞沉淀中加入紅細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解1-5 min；
3. 800-1000 rpm離心5-8 min，離心棄去上層紅色清液；
4. 收集沉淀部分，加入Hank’s液或無血清培養(yǎng)液離心洗2-3次；
5. 如裂解不完全可重復步驟2和3；
6. 根據(jù)實驗需要用適當溶液重懸細胞，用于后續(xù)實驗；如提取RNA，最好是于步驟4開始使用DEPC水配制的溶液進行。
注意事項
1. 本品經(jīng)過濾除菌，使用時請注意無菌操作，避免細菌污染。
2. 后續(xù)試驗如是用于細胞培養(yǎng)，操作過程中應注意在超凈工作臺中完成，并注意無菌操作，以免細胞被污染，影響細胞培養(yǎng)。
3. 在離心洗滌后，如發(fā)現(xiàn)極微量的紅細胞，可繼續(xù)試驗，不會影響后續(xù)檢測。
4. 操作時請穿實驗服，佩戴一次性手套。
本產(chǎn)品僅供科研用途，不用于臨床診斷！
凡合肥萬物生物科技有限公司銷售的產(chǎn)品均有嚴格的質(zhì)量保證。如發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品存在包裝規(guī)格疑問，請于收貨之日起七日內(nèi)向我公司總部或當?shù)剞k事處提出，并請保證該產(chǎn)品，以備本公司進行核對檢驗。如果發(fā)現(xiàn)有質(zhì)量問題，請于收貨后一月內(nèi)保留產(chǎn)品50%以上的量，以便本公司回收產(chǎn)品進行質(zhì)檢，確認產(chǎn)品質(zhì)量。如逾期，則視為已經(jīng)對本公司產(chǎn)品進行驗收。 聲明：如發(fā)生產(chǎn)品索賠事宜，本公司僅在產(chǎn)品價格范圍內(nèi)酌情賠償，恕不接受超出產(chǎn)品價格范圍之賠償?？蛻粼谑褂眠^程中有任何技術(shù)問題可以撥打技術(shù)售后服務電話我們隨時給予解答。
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