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產(chǎn)品詳情
操作說明
注意事項
產(chǎn)品信息
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產(chǎn)品名稱 |
產(chǎn)品編號 |
規(guī)格 |
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支原體檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光法） |
FKU018 |
20T |
產(chǎn)品簡介
本支原體檢測試劑盒是利用支原體中特有酶的活性設(shè)計而成，該酶可將支原體檢測試劑中特有的底物分解同時將ADP轉(zhuǎn)換成ATP，螢光素酶在ATP存在下催化螢光素氧化發(fā)出生物螢光，可通過化學(xué)發(fā)光儀(luminometer)進(jìn)行測定，以反應(yīng)待檢樣品是否存在支原體污染。整個檢測過程操作簡單，只需兩個步驟，耗時約15 min。該方法靈敏度高，檢測的是真正具有生物活性的支原體，所以檢測結(jié)果比PCR方法更準(zhǔn)確。
儲存與運輸
冰袋（wet ice）運輸；-20℃保存，支原體檢測試劑A需避光保存；有效期12個月。
組成
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Component Number |
Component |
G1901-20T |
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G1901-1 |
支原體檢測試劑A |
1 mL |
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G1901-2 |
支原體檢測試劑B |
1 mL |
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說明書 |
1份 | |
操作步驟
1. 取適量（1 mL足夠）培養(yǎng)3-6天的細(xì)胞上清，400 g離心3 min，以去除沉淀少量漂浮細(xì)胞或碎片，取上清立即檢測，或者4℃保存在一周內(nèi)檢測，或者-80℃保存半年內(nèi)檢測；
2. 將所有檢測試劑和檢測樣品均平衡至室溫，最適宜的溫度為20-25℃；
3. 在96孔檢測板（非透明板，建議用專用96孔白板）中加入50 μL待檢測樣品、陰性對照（如無菌水或PBS）；
4. 加入50 μL支原體檢測試劑A，輕柔混勻不要產(chǎn)生氣泡，室溫（20-25℃）避光放置5 min。然后用具有檢測化學(xué)發(fā)光的酶標(biāo)儀進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測，計讀數(shù)為A。（請根據(jù)儀器靈敏度適當(dāng)調(diào)整相應(yīng)的參數(shù)，每個孔的檢測時間一般為0.25-1 s）；
5. 加入50 μL的支原體檢測試劑B，輕柔混勻不要產(chǎn)生氣泡，室溫（20-25℃）避光放置10 min。然后用具有檢測化學(xué)發(fā)光的酶標(biāo)儀進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測，計讀數(shù)為B。（注：請嚴(yán)格按照加入支原體檢測試劑B后10 min進(jìn)行檢測，不應(yīng)提前或延后，否則會影響結(jié)果判斷）；
6. 計算比值(Ratio)=讀值B/讀值A(chǔ)。
A. 如果B/A>1.1，說明細(xì)胞培養(yǎng)物中存在支原體污染；
B. 如果B/A<0.9，說明細(xì)胞培養(yǎng)物中沒有支原體污染；
C. 如果B/A比值在0.9-1.1之間，建議繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞24-48 h后，再次檢測確定是否存在支原體污染。如果B/A比值仍在0.9-1.1之間，則該細(xì)胞培養(yǎng)物沒有支原體污染，為支原體陰性。
注意事項
1. 支原體檢測試劑A中含有螢光素酶，反復(fù)凍融會逐漸使其失活，建議第一次解凍后應(yīng)適當(dāng)分裝保存，分裝容器需潔凈無污染。
2. 檢測時強烈建議使用白色或者黑色不透光96孔板，使用普通透明96孔板會使得相鄰檢測孔出現(xiàn)干擾。
3. 人體皮膚表面含有豐富的ATP，檢測時請帶好實驗手套、口罩，其他耗材也應(yīng)潔凈、無污染，防止外源引入ATP污染。
4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
產(chǎn)品僅供科研用途，不用于臨床診斷！
凡合肥萬物生物科技有限公司銷售的產(chǎn)品均有嚴(yán)格的質(zhì)量保證。如發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品存在包裝規(guī)格疑問，請于收貨之日起七日內(nèi)向我公司總部或當(dāng)?shù)剞k事處提出，并請保證該產(chǎn)品，以備本公司進(jìn)行核對檢驗。如果發(fā)現(xiàn)有質(zhì)量問題，請于收貨后一月內(nèi)保留產(chǎn)品50%以上的量，以便本公司回收產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)檢，確認(rèn)產(chǎn)品質(zhì)量。如逾期，則視為已經(jīng)對本公司產(chǎn)品進(jìn)行驗收。 聲明：如發(fā)生產(chǎn)品索賠事宜，本公司僅在產(chǎn)品價格范圍內(nèi)酌情賠償，恕不接受超出產(chǎn)品價格范圍之賠償。客戶在使用過程中有任何技術(shù)問題可以撥打技術(shù)售后服務(wù)電話我們隨時給予解答。
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