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腺病毒
來源：萬物 發(fā)布時間：2021-08-31
腺病毒質(zhì)粒系統(tǒng)概述
腺病毒是一類中等大小、無包膜的雙鏈DNA病毒，已知可導(dǎo)致人類輕度至重度呼吸道疾病。腺病毒在研究中的優(yōu)勢包括它們的大包裝容量(>8 kb)、高滴度和高水平的轉(zhuǎn)基因表達(dá)。此外，這些病毒能夠以幾乎100%的效率靶向廣泛的分裂和非分裂細(xì)胞類型。不像慢病毒某人逆轉(zhuǎn)錄酶病毒，腺病毒不會整合到宿主基因組中。腺病毒的缺點包括短暫的轉(zhuǎn)基因表達(dá)，以及由病毒衣殼誘導(dǎo)的實質(zhì)性免疫反應(yīng)。
腺病毒可以通過幾種方法產(chǎn)生，其中最常見的涉及腺病毒質(zhì)粒在哺乳動物細(xì)胞或微生物(包括細(xì)菌和酵母)中的同源重組。兩個質(zhì)粒，稱為穿梭質(zhì)粒和腺病毒(也稱為骨架)質(zhì)粒，被重組到一個包含兩個質(zhì)粒序列的DNA分子中。然后可以將這種DNA分子轉(zhuǎn)染到哺乳動物包裝細(xì)胞系中，產(chǎn)生腺病毒顆粒。。
腺病毒成分
腺病毒基因組是一個線性的36Kb雙鏈DNA (dsDNA)分子，包含多個重剪接轉(zhuǎn)錄物?；蚪M的兩端是我已轉(zhuǎn)換terminal repeats (ITRs)?；蚍譃樵缙?/span>(E1-4)和晚期(L1-5)轉(zhuǎn)錄本。有57種可接受的人腺病毒類型，大多數(shù)腺病毒載體基于Ad5。基于Ad5的載體使用柯薩奇-腺病毒受體(CAR)進(jìn)入細(xì)胞。
重組腺病毒刪除了兩個基因:E1和E3。E1由腺病毒包裝線293或911；它從病毒載體中的缺失使病毒復(fù)制能力下降。E3參與逃避宿主免疫，并不是病毒產(chǎn)生的關(guān)鍵。這兩個成分的缺失導(dǎo)致轉(zhuǎn)基因包裝容量為>8 Kb。構(gòu)建體包含左右臂，以促進(jìn)轉(zhuǎn)基因同源重組到腺病毒質(zhì)粒中。
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標(biāo)書基金實驗咨詢 表觀遺傳組學(xué)分析
課題實驗結(jié)題指導(dǎo) 細(xì)胞分子功能驗證
實驗培訓(xùn)文章潤色 動物模型裸鼠成瘤
臨床檢測科研轉(zhuǎn)化 病理染色分子互作