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產(chǎn)品詳情
操作說明
注意事項
產(chǎn)品簡介
免疫熒光技術(shù)利用熒光分子標(biāo)記的抗體對與之結(jié)合的抗原進行定位，實現(xiàn)對蛋白質(zhì)、聚糖蛋白、小生物分子及非生物分子等進行亞細胞可視化觀察。在此過程中，組織中的自發(fā)熒光往往會嚴(yán)重干擾觀察。自發(fā)熒光是在免疫熒光檢測過程中產(chǎn)生的與目的信號無關(guān)的背景熒光信號的統(tǒng)稱，其產(chǎn)生的原因主要來自于組織本身的組分，例如黃素、卟啉、植物葉綠素、膠原蛋白、彈性蛋白、紅細胞、脂褐素等都會產(chǎn)生較強的自發(fā)熒光，顯著影響免疫熒光實驗的信噪比。此外組織固定中使用的福爾馬林、多聚甲醛等物質(zhì)也會產(chǎn)生大量的自發(fā)熒光。
本產(chǎn)品可有效減少組織自發(fā)熒光，提高免疫熒光檢測的信噪比。其中A液有效成分為二價銅離子，可有效減少紅細胞的自發(fā)熒光，B液有效成分為蘇丹黑，能顯著降低脂褐素引起的自發(fā)熒光。
儲存與運輸
常溫避光保存，有效期12個月。
使用方法
1. 免疫標(biāo)記前的自發(fā)熒光淬滅：組織切片在經(jīng)過抗原修復(fù)以后，用組化筆畫圈圈出組織，然后滴加組織自發(fā)熒光淬滅劑A液覆蓋組織室溫孵育30 min，純水洗5 min。
2. 組織切片進行常規(guī)的封閉、一抗孵育、二抗孵育、DAPI復(fù)染細胞核等免疫熒光檢測步驟。
3. 免疫標(biāo)記后的自發(fā)熒光淬滅：滴加組織自發(fā)熒光淬滅劑B液覆蓋組織室溫避光孵育5 min，流水沖洗3 min。
4. 封片：玻片置于PBS中晃動洗滌（可置于脫色搖床上）3次，每次5 min。切片稍甩干后封片，鏡檢。
注意事項
1. 不同樣本其自發(fā)熒光原理不同，使用組織自發(fā)熒光淬滅劑的效果可能會有差異。
2. 理論上講，針對自發(fā)熒光的淬滅劑也會一定程度降低抗體的熒光強度。經(jīng)測試，本試劑對自發(fā)熒光的淬滅程度遠遠超出抗體熒光強度的降低，在二者之間有較好的平衡。
3. 加入組織自發(fā)熒光淬滅劑B液后組織會染成深藍色，但是不會影響熒光拍照。
4. 切片經(jīng)B液孵育完以后可以用水或者PBS洗滌，但不能用含吐溫的溶液洗滌，否則B液被過度洗去影響背景熒光淬滅效果。
5. 組織自發(fā)熒光淬滅劑B液每次用完后務(wù)必將瓶蓋擰緊，防止溶劑揮發(fā)。
6. 操作時請穿實驗服，并佩戴一次性手套。
本產(chǎn)品僅供科研用途，不用于臨床診斷！
凡合肥萬物生物科技有限公司銷售的產(chǎn)品均有嚴(yán)格的質(zhì)量保證。如發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品存在包裝規(guī)格疑問，請于收貨之日起七日內(nèi)向我公司總部或當(dāng)?shù)剞k事處提出，并請保證該產(chǎn)品，以備本公司進行核對檢驗。如果發(fā)現(xiàn)有質(zhì)量問題，請于收貨后一月內(nèi)保留產(chǎn)品50%以上的量，以便本公司回收產(chǎn)品進行質(zhì)檢，確認(rèn)產(chǎn)品質(zhì)量。如逾期，則視為已經(jīng)對本公司產(chǎn)品進行驗收。 聲明：如發(fā)生產(chǎn)品索賠事宜，本公司僅在產(chǎn)品價格范圍內(nèi)酌情賠償，恕不接受超出產(chǎn)品價格范圍之賠償?？蛻粼谑褂眠^程中有任何技術(shù)問題可以撥打技術(shù)售后服務(wù)電話我們隨時給予解答。
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